飼料中真蛋白的檢測方法
發(fā)布人:農(nóng)富康??????2015-9-8 8:51:44??????點擊:
一、測定原理
飼料蛋白質經(jīng)沸水提取并在堿性溶液中被硫酸銅沉淀。過濾和洗滌后,可將純蛋白質和非蛋白質含氮物分離,再用凱氏定氮法測定沉淀物中的蛋白質含量。
二、儀器設備
(1)燒杯:200ml
(2)定型濾紙
(3)其他設備與粗蛋白質測定法相同
三、試劑與配制
(1)100g.L-1硫酸銅溶液;分析純硫酸銅(5水硫酸銅)10g溶于100ml水中
(2)25g.L-1氫氧化鈉溶液:將2.5g分析純氫氧化鈉溶于100ml水中
(3)10g.L-1氯化鋇溶液:1g氯化鋇溶于100ml水中
(4)2mol.L鹽酸溶液
(5)其他試劑與粗蛋白質測定法相同
四、測定步驟
準確稱取試樣1g左右(精確至0.0001g)置于200ml燒杯中,加50ml水中,加熱至沸。
加入20ml硫酸銅溶液,20ml氫氧化鈉溶液,用玻璃棒充分攪拌,放置1h以上。用定性濾紙過濾,然后用60~80攝氏度熱水洗滌沉淀5或6次,用氯化鋇溶液5滴和鹽酸溶液1滴檢查濾紙,直至不生成白色硫酸鋇沉淀為止。將沉淀和濾紙放在65攝氏度烘箱干燥2h,然后全部轉移到凱氏燒瓶中,按半微量凱氏定氮法進行氮的測定。
飼料蛋白質經(jīng)沸水提取并在堿性溶液中被硫酸銅沉淀。過濾和洗滌后,可將純蛋白質和非蛋白質含氮物分離,再用凱氏定氮法測定沉淀物中的蛋白質含量。
二、儀器設備
(1)燒杯:200ml
(2)定型濾紙
(3)其他設備與粗蛋白質測定法相同
三、試劑與配制
(1)100g.L-1硫酸銅溶液;分析純硫酸銅(5水硫酸銅)10g溶于100ml水中
(2)25g.L-1氫氧化鈉溶液:將2.5g分析純氫氧化鈉溶于100ml水中
(3)10g.L-1氯化鋇溶液:1g氯化鋇溶于100ml水中
(4)2mol.L鹽酸溶液
(5)其他試劑與粗蛋白質測定法相同
四、測定步驟
準確稱取試樣1g左右(精確至0.0001g)置于200ml燒杯中,加50ml水中,加熱至沸。
加入20ml硫酸銅溶液,20ml氫氧化鈉溶液,用玻璃棒充分攪拌,放置1h以上。用定性濾紙過濾,然后用60~80攝氏度熱水洗滌沉淀5或6次,用氯化鋇溶液5滴和鹽酸溶液1滴檢查濾紙,直至不生成白色硫酸鋇沉淀為止。將沉淀和濾紙放在65攝氏度烘箱干燥2h,然后全部轉移到凱氏燒瓶中,按半微量凱氏定氮法進行氮的測定。
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